Hei ada! Sebagai pembekalSebatian polyhydroxy, Saya mendapat banyak pengetahuan tentang bahan -bahan yang menakjubkan ini dan cara untuk memisahkannya. Sebatian polyhydroxy, yang mengandungi pelbagai kumpulan hidroksil (-OH), digunakan secara meluas dalam pelbagai industri, dari farmaseutikal hingga makanan dan kosmetik. Oleh itu, mari kita menyelam kaedah kromatografi untuk memisahkan sebatian ini.
Kromatografi Cecair (LC)
Kromatografi cecair adalah salah satu teknik yang paling biasa digunakan untuk memisahkan sebatian polyhydroxy. Ia berfungsi dengan lulus fasa mudah alih cecair melalui lajur yang dibungkus dengan fasa pegun. Komponen yang berlainan dalam sampel berinteraksi secara berbeza dengan fasa pegun, menyebabkan mereka elute pada masa yang berlainan.
Kromatografi cecair fasa terbalik (RPLC)
RPLC sangat popular. Dalam kaedah ini, fasa pegun adalah bukan polar, biasanya bahan berasaskan silika yang terikat dengan kumpulan alkil rantai panjang seperti C18. Fasa mudah alih adalah campuran air dan pelarut organik seperti metanol atau asetonitril. Sebatian polyhydroxy, yang polar disebabkan oleh kumpulan hidroksil mereka, berinteraksi dengan fasa mudah alih lebih daripada fasa pegun. Semakin kutub sebatian, semakin cepat ia elut dari lajur.
Kaedah ini hebat kerana ia agak mudah untuk ditubuhkan dan boleh memisahkan pelbagai sebatian polyhydroxy. Sebagai contoh, dalam analisis alkohol gula (sejenis sebatian polyhydroxy), RPLC dapat memisahkan alkohol gula yang berbeza berdasarkan struktur molekul dan polariti mereka.
Normal - Kromatografi Cecair Fasa (NPLC)
Berbeza dengan RPLC, NPLC menggunakan fasa pegun polar, seperti gel silika, dan fasa mudah alih bukan polar, seperti heksana dengan sedikit pengubah kutub seperti isopropanol. Sebatian polyhydroxy mempunyai pertalian yang lebih kuat untuk fasa pegun polar. Pemisahan ini berdasarkan perbezaan dalam interaksi hidrogen - ikatan dan dipole - dipole antara sebatian dan fasa pegun.
NPLC berguna apabila berurusan dengan sebatian polyhydroxy yang tidak baik - dipisahkan oleh RPLC. Sebagai contoh, beberapa steroid polyhydroxy kompleks mungkin lebih baik dipisahkan menggunakan NPLC kerana kumpulan fungsi kutub spesifik dan kesan sterik.
Kromatografi Gas (GC)
Kromatografi gas adalah satu lagi alat yang berkuasa untuk memisahkan sebatian polyhydroxy, walaupun biasanya memerlukan beberapa derivatisasi sampel. Dalam GC, sampel dikuap dan dibawa melalui lajur oleh gas lengai (fasa mudah alih). Fasa pegun adalah filem nipis yang dilapisi di dinding dalaman lajur.
Derivatisasi untuk GC
Oleh kerana sebatian polyhydroxy mempunyai titik mendidih yang tinggi dan turun naik yang rendah, mereka perlu ditakrifkan untuk menjadikannya sesuai untuk analisis GC. Kaedah derivatisasi biasa termasuk silylation, asetilasi, dan metilasi. Sebagai contoh, silasi melibatkan penggantian atom hidrokil hidrogen dengan kumpulan trimethylsilyl (TMS). Ini bukan sahaja meningkatkan volatiliti sebatian polyhydroxy tetapi juga meningkatkan kestabilan terma mereka.
Sebaik sahaja derivatisasi, sebatian polyhydroxy boleh dipisahkan berdasarkan tekanan wap dan interaksi mereka dengan fasa pegun. GC boleh menyediakan pemisahan resolusi yang tinggi dan sering digunakan dalam analisis sebatian polyhydroxy molekul kecil, seperti gula mudah.
Ion - Kromatografi Exchange (IEC)
Ion - Kromatografi pertukaran didasarkan pada pertukaran ion antara sampel dan fasa pegun. Fasa pegun mengandungi kumpulan berfungsi yang dikenakan, sama ada kumpulan pertukaran (caj negatif) atau kumpulan pertukaran anion (positif).
Kation - Kromatografi pertukaran
Untuk sebatian polyhydroxy yang boleh membentuk kation di bawah keadaan tertentu, kromatografi pertukaran kation - boleh digunakan. Sebagai contoh, sesetengah asid polyhydroxy boleh wujud dalam bentuk ionik mereka dalam larutan. Fasa pegun mempunyai kumpulan yang dikenakan secara negatif, dan kation polyhydroxy yang dikenakan secara positif tertarik kepada fasa pegun. Pemisahan ini berdasarkan perbezaan ketumpatan dan saiz kation.
Anion - Kromatografi Pertukaran
Sebaliknya, jika sebatian polyhydroxy boleh membentuk anion, anion - kromatografi pertukaran boleh digunakan. Sebagai contoh, sesetengah fosfat gula dikenakan secara negatif dalam larutan. Fasa pegun mempunyai kumpulan yang positif, dan anion dikekalkan pada lajur. Pemisahan bergantung kepada kekuatan interaksi antara anion dan fasa pegun.
Saiz - Kromatografi Pengecualian (SEC)
Saiz - kromatografi pengecualian, juga dikenali sebagai gel - kromatografi penapisan, memisahkan molekul berdasarkan saiz dan bentuknya. Fasa pegun terdiri daripada manik berliang dengan taburan saiz liang yang ditetapkan.
Apabila sampel yang mengandungi sebatian polyhydroxy diluluskan melalui lajur, molekul yang lebih kecil boleh memasuki liang -liang manik dan mempunyai jalan yang lebih panjang melalui lajur, manakala molekul yang lebih besar dikecualikan dari liang dan elute lebih cepat. Kaedah ini berguna untuk memisahkan sebatian polyhydroxy berdasarkan berat molekul mereka, terutamanya untuk polimer atau oligomer sebatian polyhydroxy.
Kromatografi Affinity
Kromatografi Affinity mengambil kesempatan daripada interaksi khusus antara ligan yang tidak bergerak pada fasa pegun dan kompaun polyhydroxy sasaran. Sebagai contoh, jika sebatian polyhydroxy mempunyai tapak mengikat khusus untuk protein atau enzim tertentu, protein atau enzim yang sepadan boleh tidak dimobilisasi pada fasa pegun.
Kompaun polyhydroxy akan mengikat secara khusus ke ligan pada fasa pegun, manakala komponen lain dalam sampel akan melalui lajur. Kemudian, dengan mengubah keadaan seperti pH atau kekuatan ionik fasa mudah alih, sebatian polyhydroxy terikat dapat dielakkan dari lajur. Kaedah ini menyediakan pemisahan selektiviti yang tinggi dan sering digunakan dalam penyucian sebatian polyhydroxy bioaktif.
Pertimbangan Praktikal
Apabila memilih kaedah kromatografi untuk memisahkan sebatian polyhydroxy, beberapa faktor perlu dipertimbangkan. Pertama, sifat sebatian polyhydroxy sendiri, termasuk berat molekul, polaritas, caj, dan kestabilan mereka. Kedua, matriks sampel, yang mungkin mengandungi bahan lain yang boleh mengganggu pemisahan. Ketiga, kepekaan dan resolusi analisis yang diperlukan.
Sebagai contoh, jika anda mempunyai sampel biologi yang kompleks yang mengandungi pelbagai sebatian polyhydroxy dan biomolekul lain, gabungan kaedah kromatografi yang berbeza mungkin diperlukan. Anda mungkin bermula dengan kaedah pemisahan yang luas seperti saiz - kromatografi pengecualian untuk mengecilkan sampel berdasarkan saiz molekul, dan kemudian gunakan kaedah yang lebih spesifik seperti kromatografi pertukaran ion atau kromatografi afiniti untuk pembersihan selanjutnya.
Kesimpulan
Sebagai pembekalSebatian polyhydroxy, Saya tahu betapa pentingnya mempunyai kaedah pemisahan yang boleh dipercayai untuk sebatian ini. Sama ada anda seorang penyelidik di makmal, penganalisis kawalan kualiti di kilang, atau seseorang yang terlibat dalam pengeluaran produk menggunakan sebatian polyhydroxy, memahami kaedah kromatografi ini dapat membantu anda mendapatkan hasil yang tepat dan produk berkualiti tinggi.
Sekiranya anda berminat dengan kamiSebatian polyhydroxyAtau memerlukan lebih banyak maklumat mengenai pemisahan dan analisis mereka, berasa bebas untuk menjangkau. Kami sentiasa gembira untuk membincangkan keperluan anda dan menyediakan penyelesaian terbaik. Kami juga menawarkan produk berkaitan sepertiDerivatif thiophene sensitiviti cahaya tinggidanDerivatif anthraquinoneuntuk pelbagai aplikasi. Hubungi kami untuk memulakan perbincangan perolehan dan cari produk yang sesuai untuk projek anda!
Rujukan
- Snyder, LR, Kirkland, JJ, & Glajch, JL (2010). Pembangunan kaedah HPLC praktikal. John Wiley & Sons.
- McMaster, MC (2008). Kromatografi gas dan spektrometri massa: panduan praktikal. John Wiley & Sons.
- Skop, RK (1994). Penyucian Protein: Prinsip dan Amalan. Springer.